Какой тип настройки камеры требуется для фотографирования люциферазы?

Question

Я работаю с люциферазой с длиной волны синего 480 нм, и я хочу сфотографировать ее. Проблема в том, что я вижу люциферазу, сияющую во всей своей красе передо мной, но как бы я ни старался, я не могу сфотографировать люциферазу с помощью моей зеркальной фотокамеры (Nikon D80), используя объектив Nikon 50 мм и объектив Nikon 35 мм. Я пытался удалить фильтры (Nikon L37 и Hoya UV).

Мне любопытно, если мне не хватает определенного объектива / фильтра или мне следует снимать, используя другую настройку освещения. Я уже выставляю на 30 "при f / 22 на ISO 1600. Возможно, дольше?

Answer 1

Эта длина волны определенно находится в пределах спектра, который вы можете захватить с любой линзой, с фильтрами или без них. Цифровые датчики захватывают между 350-1000 нм Если он светится, то вы бы хотели, чтобы это был ваш основной источник света. Любой дополнительный свет, который вы направите на него, ослабит свечение от вашего объекта и сделает его труднее видеть.

Какую диафрагму вы используете? Если это не невероятно тускло, я не могу представить, чтобы 30 "не захватывали что-либо, если вы не используете очень маленькое отверстие.

Вы делаете это в темной комнате на темном фоне? Что вы видите в своих 30 "экспозициях?

Методом проб и ошибок вы можете сделать диапазон выдержек (и ISO), чтобы попытаться отрегулировать хорошее значение экспозиции. Если вы видите это своими глазами, вы сможете сфотографировать его без специального оборудования.

Answer 2

Если у вас есть другой источник света, он может легко «размыть» слабое свечение. У вас не должно быть никакого другого света, чтобы начать.

Фокус с включенным светом. Либо используйте ручную фокусировку, либо, если позволяет ваша камера, установите ручную фокусировку, временно переключите на AF, сфокусируйтесь, а затем вернитесь к MF, чтобы сфокусировать камеру.

Затем выключите другое освещение, чтобы люцифераза была единственным источником освещения, откройте его и посмотрите, что вы получите.

Если это не сработает, ручная экспозиция, а также ручная фокусировка позволяют вам контролировать работу камеры и выставлять ее в диапазоне вероятных экспозиций.

Я только что попытался сфотографировать свой не особо яркий светящийся циферблат наручных часов в полной темноте. На 250 мм и на расстоянии около 500 мм, так что часы, занимающие 1/3 ширины кадра, составляли 6 секунд при f5,6 при 800 ISO. Отдельные часовые метки, которые не очень яркие для глаз при комнатном освещении, ярко светятся на фотографии, когда они являются единственным источником света.

Thusly. Фокусировка "могла бы быть намного лучше [тм]: -)

6S, f5.6, ISO800.

Ключевые вопросы - используете ли вы другое освещение и что вы видите на своих изображениях.

Эти многие изображения Люциферазы предполагают разумный уровень освещенности и не выглядят так, как будто их трудно сфотографировать.